Download Free Medical Proteomics PowerPoint Presentation

Proteomics PowerPoint Presentation

DOWNLOAD MEDICAL POWERPOINT PRESENTATION

About This Presentation

Description : its about proteo mix

Tags : protein,proteomics

Published on : May 25, 2021 | Views : 1716 | Downloads : 2

Shareable Url :

Embed Code :

Comment

Transcript

Slide 1-

پروتئومیکس مقدمه : از آنجایی که رونویسی ژن ها mRNA به دست می آید وپس از آن با ترجمه mRNAپروتیین به دست می آید برای درک کارکرد ژنها باید ویژگی پروتیین های حاصل از رونویسی و ترجمه آن ها را بدانیم از این رو 3 اصطلاح داریم پروتئوم: به تمام پروتیین های موجود در ارگانیسم گفته می شود پروتئومیک: به آنالیزکلی پروتئین ها گفته میشود لاتوم: به مطالعه یکدست از پروتئین ها اطلاق می شود که تحت شرایط خاص بیان می شوند
Slide 2-

الکتروفورز لازمه تفکیک پروتئینها بر روی ژل آکریل آمید این است که نمونه فقط حاوی چند پروتئین با اندازه های مختلف باشد. اما هزاران پروتئین در سلول وجود دارد که بسیاری از آنها، دارای اندازه مشابهی هستند و در صورتی که نمونه پروتئینی سلول الکتروفورز شود، شاهد باندهای ژل به شکل لکه خواهیم بود برای حل این مشکل از الکتروفورز دو بعدی(2D PAGE) استفاده میکنیم. دراین نوع الکتروفورز پروتئین ها در دو مرحله جداسازی می شوند بر مبنای بار بر مبنای اندازه
Slide 3-

بعد اول: فوکوسینگ ایزوالکتریک به تفکیک پروتئینها بر مبنای بار خالص آنها اشاره دارد. قابلیت فوکوسینگ ایزوالکتریک در تفکیک پروتئینها به آن دلیل است که تمام پروتئینها واسطه زنجیره های جانبی ریشه های اسید آمینهای خود دارای یک بار ذاتی هستند برای جداسازی پروتئینها بر مبنای بار نمونه در بالای ژل شیب PH بارگذاری می شود. زمانی که میدان الکتریکی اعمال شد، پروتئین ها در طول شیب pHحرکت می کنند تا اینکه به نقطه ای برسند که بار آنها خنثی شود. اغلب اولین گام در یک ژل تيوب اجرا می شود.
Slide 4-

بعد دوم: پس از خارج کردن ژل از تیوب که حاوی پروتئین های تفکیک یافته است با SDS تیمار می شود تا اینکه پروتئین ها واسرشته شده بار منفی گیرند. ژل تیوب به موازات قسمت بالایی ژل قالب پلی آکریل آمید قرار داده می شود تا پروتئین ها براساس اندازه، از یکدیگر جدا شوند و در اخر پروتیین ها رنگ آمیزی میشوند این تکنیک قادر به تفیک بسیاری از پروتیین ها میباشد
Slide 5-

ppt slide no 5 content not found
Slide 6-

western blot محققان اغلب از وسترن بلات برای شناسایی پروتئین ها استفاده می کنند. وسترن بلات به استفاده از آنتی بادی هایی متکی است که پروتئین هدف را تشخیص می دهند چنین آنتی بادی هایی به شدت اختصاصی هستند و فقط به پروتئین هدف متصل می شوند . در این آزمایش دو گام داریم گتم اول : تفکیک آنها به کمک PAGE- SDS پروتئینها از ژل به نوعی غشای نیتروسلولزی یا غشای نایلونی (با استحکام بیشتر) منتقل می شوند برای انتقال پروتئینها از ژل به غشا، جریان مناسب اعمال می شود پوشاندن نواحی خالی غشا آنتی بادی به محلول بافری افزوده و برای چند ساعت بر روی غشا هم زده می شود پیدا کردن پروتئین هدف
Slide 7-

در فرآیند اشکار سازی کار از یک آنتی بادی ثانویه استفاده می شود که با یک آنزیم نشانه گذاری شده است این آنزیم، لومینول را به هیدروژن پراکسید اکسید می کند و شکل تهییجی ۳- آمینوفتالت را ایجاد می کند که در مقابل پالس نوری (با طول موج ۴۲۵ نانومتر) تخریب می شود پینوشت: محققان از تکنیک وسترن بلات به طور گسترده در تجزیه و تحلیل پروتئین استفاده می کنند. با استفاده از این تکنیک می توان به این مطلب پی برد که آیا پروتئین بیان شده است یا خیر و در ضمن می توان به میزان پروتئین موجود در نمونه هم پی برد.
Slide 8-

ppt slide no 8 content not found
Slide 9-

ppt slide no 9 content not found